游本昌，1933年9月16日出生于江苏省泰州市海陵区，籍贯江苏省泰州市，中国内地男演员、导演、出品人、国家话剧院一级演员，毕业于上海戏剧学院。

六岁的时候，父母便把他送到上海法藏寺拜兴慈法师为师，法号乘培。1939年起，游本昌先后在上海、南京等地的小学读书，南京市考棚小学毕业后，曾就读于南京育群中学、商业职业学校、上海立信会计学校。1951年高中毕业，由南京市文联推荐加入南京文工团。

1952年，随团调任上海华东人民艺术剧院演员。同年，入上海戏剧学院表演系学习。1956年毕业后，分配到中央实验话剧院任演员。1980年，加入中国戏剧家协会。1994年创办北京本昌艺术传播中心。

1977年，出演话剧《枫叶红了的时候》，在剧中饰演陆峥嵘。1979年，出演话剧《大风歌》，在剧中饰演吕产。1981年，出演电视剧《孔乙己》，在剧中饰演描写鲁迅人物孔乙己。

1984年，与虞梦出演童话电影《“下次开船”港游记》，该片根据严文井的同名小说改编；同年，参加1984年中央电视台春节联欢晚会并表演哑剧小品《淋浴》。

1985年，主演由张戈执导的神话喜剧《济公》，在该剧中饰演助人为乐、劫富济贫的济公，其凭借该剧获得第4届中国电视金鹰奖最佳男主角。

1987年，参加央视春晚并表演戏剧小品《孙二娘开店》。1988年，与王鹰共同主演剧情电影《姑苏一怪》；同年，参加1988年中央电视台春节联欢晚会并表演小品《急诊》。

1989年，搭档黄宗洛、臧金生主演的神话喜剧《济公活佛》播出，在剧中饰演劫富济贫的济公。1995年，主演由刘国权执导的剧情电影《冒牌皇帝》上映。1998年，与张寄蝶、石仁全主演的电视剧《济公游记》播出，在剧中饰演活佛济公；同年，参加央视元旦晚会并表演小品《济公办学》。

2000年，自导自演百集哑剧系列剧《游先生哑然一笑》。2003年，主演由洪丹强执导的古装电视剧《清明酒家》，在剧中饰演河镇衙门的苏师爷。2004年，与邬倩倩共同主演神话爱情电视剧《九尾狐与仙鹤》，在剧中饰演神仙太白金星，该剧改编于中国流传的故事《孟姜女哭长城》，讲述了孟姜女和万喜良的故事。

2005年10月4日，和曹骏、焦恩俊出演的古装神话电视剧《宝莲灯》在中央电视台电视剧频道首播，在剧中饰演神仙太上老君。2009年4月7日，自导自演的神话电视剧《了凡》播出。2009年，游本昌看到一部关于李叔同的话剧剧本，他毫不犹豫将其买下。

2010年，与王紫伊主演的悬疑电影《古刹风云》上映，该片根据南宋初期一个公案—真假柔福公主案改编而成；随后，和薛之谦出演励志电影《一只狗的大学时光》，在片中饰演三轮车大爷；同年，与杨紫琼出演古装武侠电影《剑雨》。

2011年3月17日，主演由乌尔善执导的动作片《刀见笑》上映；10月5日，搭档房祖名出演的爱情片《李献计历险记》上映。2012年6月28日，和周迅、陈坤出演的爱情片《画皮Ⅱ》在中国内地公映；同年，主演由袁子勇、吴群执导的纪录片《北京记忆》。

2013年6月11日，搭档吴孟达出演的喜剧情感电影《大片》上映；8月30日，和郭涛出演的青春爱情片《致命闪玩》上映；9月28日，与张智霖出演的爱情片《白狐》上映。

2021年8月13日，和马丽、文章主演的喜剧电影《测谎人》在全国公映，在片中饰演普渡大师；12月，获得中国国家话剧院“终身荣耀艺术家”称号。2022年11月4日，特别出演的医疗情感关怀剧《谢谢你医生》播出；12月26日，出演的古装武侠剧《少年歌行》在优酷播出。

2023年3月10日，主演的电视剧《了不起的我们》在温江开机；3月27日，官宣加盟《2023电视剧品质盛典》；12月27日，主演的当代都市剧《繁花》播出。